【生工引物怎么稀释】在分子生物学实验中，引物的正确稀释对于PCR等实验的成功至关重要。生工生物（Sangon）作为国内知名的引物合成公司，其提供的引物通常以冻干粉形式交付，使用前需根据实验需求进行适当稀释。以下是关于“生工引物怎么稀释”的详细说明。
一、引物稀释的基本原则
1. 避免污染：操作过程中应使用无菌移液器和无菌管，防止外源性DNA或RNA污染。
2. 准确配制：根据实验需要计算所需引物浓度，确保最终反应体系中的引物浓度合适。
3. 保存条件：稀释后的引物应分装保存于-20℃，避免反复冻融，以保持稳定性。
二、生工引物稀释步骤
| 步骤 | 操作内容 |
| 1 | 打开引物管，轻轻吹打使冻干粉完全溶解。 |
| 2 | 根据实验需求，计算所需稀释体积。例如：若引物为100 μM，需稀释为10 μM，可加入90 μL TE缓冲液或水。 |
| 3 | 使用移液枪吸取适量的TE缓冲液或无菌水，加入引物管中，轻轻混匀。 |
| 4 | 将稀释后的引物分装至多个小管中，标记清楚浓度和日期。 |
| 5 | 将分装好的引物置于-20℃冰箱中保存。 |
三、常见引物稀释浓度及适用场景
| 引物浓度（μM） | 适用实验类型 | 建议用量（μL/反应） |
| 100 | PCR扩增 | 1–2 |
| 50 | qPCR | 1–2 |
| 10 | 定量PCR | 1–2 |
| 2 | 退火实验 | 2–5 |
| 1 | 非常规实验 | 5–10 |
四、注意事项
- 不同实验对引物浓度的要求不同，建议根据具体实验方案调整。
- 稀释时尽量使用无核酸酶的水或TE缓冲液，避免影响后续实验。
- 若引物长时间未使用，建议定期检查是否降解或污染。
通过以上步骤和表格总结，可以清晰地了解如何正确稀释生工引物，并根据不同实验需求灵活调整。合理稀释不仅能提高实验成功率，还能延长引物的使用寿命。
